1 标本来源 嘱患者先行用清水漱口，指导其深咳出痰液置于无菌痰盒中立即送检，气管插管或气管切开的患者，则以无菌吸痰管从气管内吸痰，低倍镜视野下多核白细胞>25，上皮细胞<10个的痰标本为合格标本。
2 细菌培养 将处理后的痰标本接种于血琼脂培养基培养，18～24h后观察菌落特征并染色。
.3 药物敏感性测定 多优势菌进行分离钝化和鉴定。菌种鉴定采用美国VITEK-32自动微生物分析仪。用K-B纸片法对所分析的菌株进行常用药物的敏感性测定，质控菌按卫生部统一标准。严格按美国国家临床实验委员会标准进行操作和结果判断，同时对革兰阴性菌进行ESBLs检测。
